MOTILIDADE, VIGOR E QUALIDADE ACROSSOMAL DO SÊMEN DESCONGELADO DE VARRÃO EM DIFERENTES DILUENTES
Palabras clave:
Sêmen, diluente, conservação, varrãoResumen
Objetivou-se determinar um diluente que proporcionasse uma boa manutenção da viabilidade do sêmen do varrão, após descongelação. Foram utilizados os seguintes diluentes: Beltsville Thawing Solution (BTS), BTS + ácido 3-indol acético (IAA) e Androhep (ADHP). Os 24 ejaculados foram analisados in natura e após diluição, quanto ao vigor, motilidade espermática e integridade do acrossoma. Em seguida, foi retirado de cada ejaculado um total de 10,2 x109 espermatozoides, que foram repartidos igualmente entre os diferentes tratamentos experimentais. Os ejaculados foram diluídos em partes iguais (1:1) a 30 oC, permanecendo incubados por 2 horas, antes de iniciar a curva de congelação. Posteriormente, o sêmen foi envazado em palhetas de 0,5 mL, em uma concentração de 112 x106 sptz/mL, submetidos a vapor de nitrogênio por quatro minutos, em seguida, mergulhado no nitrogênio líquido (-196 oC). As amostras foram descongeladas em banho-maria à temperatura de (37 ºC/30s), em seguida, o conteúdo foi ressuspenso nos diferentes diluentes (1:5). As amostras foram avaliadas quantos às mesmas características do sêmen in natura. Na análise estatística, foram utilizados os testes de Mann-Whitney, com intervalo de confiança de 5%. O diluente BTS apresentou motilidade e vigor espermático melhores, em relação aquele contendo ADPH, em 5 minutos de incubação; porém, não houve diferenças significativas sobre as mesmas avaliações, quando os tratamentos foram incubados por 1 hora. A integridade acrossomal do diluente ADPH proporcionou maior número de espermatozoides íntegros (p<0,05), em relação aos demais tratamentos. Um diluente que favoreça a conservação de uma melhor qualidade espermática após descongelação ainda precisa ser desenvolvido.
Citas
BAILEY, J.; LESSAR, C.H.; JACQUES, J.; BREQUE, C.H.; DOBRISNSKI, I.; ZENG, W. Cryopreservation of boar semen and its future importance to the industry. Theriogenology, v.70, p.1251–1259, 2008.
BORTOLOZZO, F.P.; WENTZ, I.; DALLANORA, D. Situação atual da inseminação artificial em suínos. Acta Scienficae Veterinariae, v.33, n.1, p.17-32, 2005.
Colégio Brasileiro de Reprodução Animal – CBRA. Manual para exame e avaliação de sêmen animal. Belo Horizonte. v.2, 2013. 45p.
CORRÊA, M.N.; MEINCKE, W.; LUCIA Jr. T.; DESCHAMPS, J.C. Inseminação artificial em suínos. Pelotas: Printpar Gráfica e Editora, p.181, 2001.
DZIEKOŃSKA, A.; ZASIADCZYK, M.; LECEWICZ, R.; STRZEŻEK, M.; KOZIOROWSKA, G. Effects of storage in different semen extenders on the pre-freezing and post-thawing quality of boar spermatozoa. Polish Journal of Veterinary Sciences. v.18, n.4, p.733-740, 2015.
EINARSON, S.; VIRING, S Distribution of frozen-thawed spermatozoa in the reproductive tract of gilts at different intervals after insemination. Journal of Reproduction and Fertility, v.32, p.117-120, 1973.
GĄCZARZEWICZ, D.; UDAŁA, J.; PIASECKA, M.; BŁASZCZYK, B. Storage temperature of boar semen and its relationship to changes in sperm plasma membrane integrity, mitochondrial membrane potential, and oxidoreductive capability. Turkish Journal of Biology, v.39, p.582-594, 2015.
GUTHRIE, H.D.; WELCH, G.R. Impact of storage prior to cyopreservation on plasma menbrane function and fertility of boar sperm. Theriogenology, v.63, p.316-410, 2005.
HANCOCK, J.L.; HOVELL, G.J.R. The collection of boar semen. Veterinary Record, v.71, p.664-665, 1959.
JANUSKAUSKAS, A.; JOHANNISSON, A.; RODRIGUEZ-MARTINEZ, H. Assessment of soerm chromatin structure assay in relation to field fertility of frozen-thawed semen from Swedish Al bulls. Theriogenology, v.55, n.4, p.947-961, 2001.
KNOX, R.V. The current value of frozen–thawed boar semen for commercial companies. Reproduction Domestic Animal, v.46, p.4-6, 2011.
KULAKSIZ, R.; ÇEBI, Ç.; AKÇAY, E. The effect of different extenders on the motility and morphology of ram sperm frozen or stored at 4 °C. Turkish Journal of Veterinary and Animal Science, v.36, n.2, p.177182, 2012.
KUMUS, S.A. (Ed.) Manual de inseminácion artificial porcina. Madrid (Espanha), 1993. 81p.
MAIA, M.S.; BICUDO, S.D. Radicais livres, antioxidantes e função espermática em mamíferos: uma revisão. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.33, n.4, p.183-193, 2009.
MARTIN RILLO, S.; MARTINEZ, E.; GARCIA ANTIGA, C.; DE ALBA, C. Boar semen evaluation in practise. Reproduction in Domestic Animals, v.31, p.519-526, 1996.
MEDEIROS, A.A.; ARAÚJO, A.A.; MOURA, A.A.A.; CAVALCANTE, J.M.M. Utilização do azul de bromofenol conservado a 4 ºC e 29 ºC, como método de coloração vital para a avaliação do espermatozoide ovino. Revista Ciência Agrária, v.46, p.287297, 2006.
NUNES, J.F.; COMBARNOUS, Y.; OLIVEIRA, L.F.; TEIXEIRA, M.D. Utilização da água de coco e suas frações ativas na conservação in vitro do sêmen na espécie caprina. Ciência Animal, v.2, p.32-43, 1996.
PAQUIGNON, M. Semen technology in the pig. Current Topics in Veterinary Medicin Animal Science, v.30, p.202-218, 1984.
PAQUIGNON, M.; MERGOUNIS, D.; COUROT, M.; du MESNIL du BUISSON F. Technologie de la congélation de la semence de verrat: étude in vitro. Journée de Recherche Porcine en France, v.5, p.71-76, 1974.
PARRILA, I.; VAZQUEZ, J.M.; CABALLERO, I.; GIL, M.A. Optimal characteristics of spermatozoa for semen technologies in pigs. Society for Reproduction and Fertility, v.66, p.37-50, 2009.
PEREZ MARCOS, C.; SANCHEZ, R.; PALACIO, M.; PURSEL, V.G.; PEREZ GARCIA, T.; MARTIN RILLO, S. Effects of dilution rate on the motility and acrosome morphology of boar spermatozoa stores at 15 °C. Reproduction in Domestic Animals, v.26, p.112-116.
ROCA, J.; PARRILLA, I.; RODRIGUEZ-MARTINEZ, H.; GIL, M.A.; CUELLO, C. Approaches towards efficient use of boar semen in the pig industry. Reproduction Domestic Animal, v.46, p.79–83, 2011.
SALAMON, S.; MAXWELL, W.M.C. Storage of ram semen. Animal Reproduction Science, v.62, p.77-111, 2000.
SARIOZKAN, S.; TURK, G.; CANTURK, F.; YAY, A. The effect of bovine serum albumin and fetal calf serum on sperm quality, DNA fragmentation and lipid peroxidation of the liquid stored rabbit semen. Cryobiology, v.67, p.1-6, 2015.
SLAWETA, R.; SIKORSKA, J.; STRZEZEK, J. The effect of storing boar semen at 15-18 °C for varying lengths of time on morphology and biological value of spermatozoa. Medicin Wet, v.37, p.687-690, 1981.
TONIOLLI, R. Pouvoir fécondant dês spermatozoïdes de verrat: amèlioration des conditions de conservation. Université François Rabelais de Tours - France, These de Doctorat 91p., 1996. (cópia da Tese na Biblioteca da Universidade Estadual do Ceará). Resumo disponível em http://cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=182303.
TONIOLLI, R. Morfologia dos espermatozoides de suínos, diluídos no diluidor de Beltsville (BTS) adicionados do ácido-3-indol acético. Ciência Animal, v.9, p.61-65, 1999.
TONIOLLI, R.; JATAHY, P.C.; SILVA, M.C.; MOREIRA, F.R.C. Utilização do leite desnatado e do ácido 3-indol acético na conservação do sêmen suíno. Ciência Animal, v.11, n.1, p.21-26, 2001.
Toniolli, r; Silva, m.c.; Chaves, r.n. Utilização de diferentes meios de ressuspensão para o sêmen do varrão após descongelação. Revista brasileira de Ciência Veterinária, v.16, n.01, p.41-45, 2009.
VALE FILHO, V.R. Patologia do sêmen-diagnóstico andrológico e classificação do Bos Taurus e Bos Indicus quanto à fertilidade para uso como reprodutor em condições de Brasil. De um estudo de 1088 touros. UFMG – Escola de veterinária, 2ª ed., 1980.
WABERSKI, D., DIRKSEN, G., WEITZE, K.F., LEIDING, C.; HAHN, R. Spermienmotilität und-morphologie in ihrer auswirkung auf die fruchtbarkeit von besamungsebern in feldversuchen. Tieräerzt Praxis, v.18, p.591-594, 1990.
WATSON, P.F. The causes of reduced fertility with cryopreserved semen. Animal Reproduction Science, v.60-61, p.481-492, 2000.
WEIZE, K. Long-term storage of extender boar semen. In Johnson L.A., Rath D, editors. Procedures for boar semen preservation II, vol. 1. Berlim: Paul Parey Scientific Publishers. p.231-253, 1991.
YAVETZ, H.; HAUSER, R.; YOGEV, L.; BOTCHAN, A.; LESSING, J.B.; HOMONNAI, Z.T.; PAZ, G. Advanced methods for evaluation of sperm quality. Andrology, v.27, p.31-35, 1995.
YI, Y.J.; IM, G.S.; PARK, C.S. Lactose-egg yolk diluent supplemented with N-acetyl-D-glucosamine affect acrossome morphology and motility of frozen-thawed boar semen. Animal Reproduction Science, v.74, p.187-194, 2002.