AVALIAÇÃO ULTRAESTRUTURAL DE ESPERMATOZOIDE CAPRINO CRIOPRESERVADO, ATRAVÉS DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO
Palabras clave:
Reprodução animal, Microscopia eletrônica, Cabra, Pequenos ruminantesResumen
A avaliação da ultraestrutura permite a análise da célula espermática em uma proporção subcelular que não é observada na microscopia óptica. A microscopia eletrônica de transmissão (MET) é uma ferramenta utilizada para determinar o tamanho e a forma de estruturas inorgânicas e biológicas com base na interação de elétrons incidentes na matéria. Nesse sentido, com o uso do MET, objetivou-se avaliar as alterações ultraestruturais após a manipulação do sêmen, principalmente no processo de congelamento-descongelamento, que não foram observadas em testes com microscopia óptica, ou seja, a integridade morfológica das membranas e organelas de esperma de cabra. A avaliação aconteceu no Instituto de Biociências da Universidade de Brasília (UnB). As palhetas de sêmen foram descongeladas e lavadas em PBS. Em seguida, foram centrifugados e fixados, contrastados em bloco e submetidos à desidratação. As amostras foram colocadas para polimerização e cortes ultrafinos foram feitos e armazenados até o momento da avaliação do MET. Nas análises ultraestruturais por MET no presente trabalho, nenhuma ação prejudicial ocorreu nos grupos controle ou experimental. As regiões da cabeça (membrana plasmática e acrossoma) permaneceram preservadas, sem alterações no DNA. Em conclusão, MET é uma ferramenta especialmente útil para avaliação celular.
Citas
BURGESS, C.M.; BREDL, J.C.S.; PLUMMER, J.M.; INGLATERRA, G.C. Vital and ultrastructural changes in dog spermatozoa during cryopreservation. Journal of Reproduction and Fertility, v.57, supl.1, p.357-363, 2001.
ENCISO, M.; CISALE, H.; JOHNSTON, S.D.; SARASA, J.; FERNANDEZ, J.L.; GOSÁLVEZ, J. Major morphological sperm abnormalities in the bull are related to sperm DNA damage. Theriogenology, v.76, n.1, p.23-32, 2011.
FRANCO, J.G.Jr.; MAURI, A.L.; PETERSEN, C.G.; MASSARO, F.C.; SILVA, L.F.I.; FELIPE, V.; CAVAGNA, M.; PONTES, A.; BARUFFI, R.L.R.; OLIVEIRA, J.B.A.; VAGNINI, L.D. Large nuclear vacuoles are indicative of abnormal chromatin packaging in human spermatozoa. International Journal of Andrology, v.35, n.1, p.46-51, 2011.
LAVOLPE, M.; LORENZI, D.; GRECO, E.; NODAR, F.; SEDÓ, C. A. Relationship Between Sperm DNA Fragmentation and Nuclear Vacuoles. JBRA Assisted Reproduction, v.19, n.2, p.70-74, 2015.
MOURA, C.S.; NUNES, A.K.S.; SILVA, B.S.; PEIXOTO, C.A.; SILVA, A.R.; SILVA, S.V.; GERRA, M.M.P. Efeito da temperatura de descongelação na integridade de espermatozoides criopreservados de cães. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v.65, n.4, p.1057-1064, 2013.
SILVA, E.C.B. Efeito da adição de diferentes crioprotetores e antioxidantes na criopreservação do sêmen de ovinos da raça Santa Inês. 2010. 95p. (Dissertação de Mestrado em Medicina Veterinária). Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife, 2010.
SILVA, M.A.; PEIXOTO, G.C.X.; CASTELO, T.S.; LIMA, G.L.; SILV, A.M.; OLIVEIRA, M.F.; SILVA, A.R. Cryopreservation of collared peccary (Pecari tajacu) semen using different freezing curves, straw sizes, and thawing rates. Cryobiology, v.67, n.1, p.50-55, 2013.
SILVA, R.A.C.; SOUZA, T.O.; DIAS, L.P.; ANDRADE, T.J.A.S. Ação do extrato metanólico da Moringa oleifera sobre o crescimento micelial de fitopatógenos. In: Congresso de Pesquisa e Inovação da Rede Norte e Nordeste de Inovação Tecnológica, 4., 2009, Belém-PA. Anais... Belém: Congresso de Pesquisa e Inovação da Rede Norte e Nordeste de Inovação Tecnológica, 2009.
SOARES, A.T.; SILVA, S.V.; ALMEIDA, F.C.; LEMOS, P.F.B.A.; NUNES, J.F.; PEIXOTO, C.A. Espermatozoides caprinos criopreservados em meio à base de leite desnatado acrescido de glutationa reduzida. Ciência Rural, v.41, n.11, p.1991-1997, 2011.