DETECÇÃO MOLECULAR DE GRUPOS DE BACTÉRIAS FERMENTADORAS NO RÚMEN DE BOVINOS E BUBALINOS EM SANTARÉM-PA

Autores

  • Leandro Lira de SOUZA Universidade Federal do Oeste do Pará (UFOPa)
  • Márcia Mourão Ramos AZEVEDO Universidade Federal do Oeste do Pará (UFOPa).
  • Adriane Xavier HAGER Universidade Federal do Oeste do Pará (UFOPa)

Palavras-chave:

Biologia molecular, RNA ribossomal, ruminantes

Resumo

O objetivo deste trabalho foi detectar grupos de bactérias do conteúdo ruminal de bubalinos e bovinos utilizando técnicas de Biologia Molecular. As coletas foram realizadas no Frigorífico Mararu, na cidade de Santarém-PA. Foram coletadas 10 amostras de líquido ruminal, sendo 5 de bovinos e 5 de bubalinos. A extração de DNA foi realizada segundo o protocolo do Kit Brasílica baseado em sílica. Para a detecção das bactérias, foram utilizados os primers 16S L2 e 1472, AR e BR. Foi utilizado para a PCR, num volume de 25 μl, o kit PCR Mix LGC 2X. As amostras foram corridas em gel de agarose 3% corado com Azul de Bromofenol e GelRed. Após a corrida, o gel foi visualizado em radiação UV. Os primers utilizados na amplificação da região do gene 16S rRNA se mostraram eficientes para os estudos de detecção das bactérias ruminais. Foi observada a diferença entre bovinos e bubalinos, onde os primers L2 e 1472 amplificaram em bovinos o grupo de bactérias fibrolíticas e em bubalinos o grupo de bactérias não fibrolíticas. Enquanto os primers AR e BR amplificaram o grupo de bactérias não fibrolíticas para bovinos e o grupo de bactérias fibrolíticas para bubalinos. Os trabalhos de identificação de bactérias ruminais em bubalinos é escasso, por isso a importância dos resultados encontrados. Houve diferença nos grupos de microrganismos encontrados nos ruminantes entre bubalinos e bovinos, e no tipo de primer utilizado, mostrando a importância do estudo das bactérias presentes no rúmen. O estudo realizado necessita de uma abordagem maior, como o sequenciamento das amostras de DNA para se identificar melhor as espécies presentes dentro dos diferentes grupos detectados. Outras técnicas de Biologia Molecular podem ser utilizadas para uma melhor acurácia dos dados encontrados, como o uso da PCR em tempo real.

Referências

DEL VESCO, A.P.; SILVA, S.C.C.; BAGATOLI, A.; GASPARINO, E.; SOARES, M.A.M.; VOLTOLINI, D.M.; BUZZO, A.M.R.; MARQUES, L.A.; KHATLAB, A.S.

Identificação de bactérias ruminais via PCR - Multiplex utilizando DNA extraído diretamente do líquido ruminal fresco e conservado em metanol. Acta Tecnológica, v.7, n.2, 2012.

FURLAN, R.L.; MACARI, M.; FARIA FILHO, D.E. Anatomia e fisiologia do trato gastrintestinal. In: BERCHIELLI, T.T.; PIRES, A.V.; OLIVEIRA, S.G. (Ed.) Nutrição de ruminantes. 1a ed., Jaboticabal: Funep, p.1-23, 2006.

JAMI, E.; MIZRAHI, I. Composition and similarity of bovine rumen microbiota across individual animals. PLoS One, v.7, n.3, p.1-8, 2012.

KOIKE, S.; YOSHITANI, S.; KOBAYASHI, Y.; TANAKA, K. Phylogenetic analysis of fiber‐associated rumen bacterial community and PCR detection of uncultured bacteria. FEMS Microbiology Letters, v.229, p.23–30, 2003.

KONG, Y.; TEATHER, R.; FORSTER, R. Composition, spatial distribution, and diversity of the bacterial communities in the rumen of cows fed diferent forages. FEMS Microbiology Ecology, v.74, p. 612–622, 2010.

KOZLOSKI, G.V. Bioquímica dos ruminantes. Santa Maria, RS: 1a ed., Editora UFSM, 2002. 140p.

MCSWEENEY, C.S.; DENMAN, S.E.; WRIGHT, A.; YU, Z. Application of recent

DNA/RNA-based techniques in rumen ecology. Asian-Australasian Journal of Animal Science, v.20, n.2, p.283, 2007.

RUSSELL, J.B.; RYCHLIK, J.L. Factors That Alter Rumen Microbial Ecology. Science, v.292, Issue 5519, p.1119-1122, 2001.

SAMPAIO, C.B.; DETMANN, E.; PAULINO, M.F.; VALADARES FILHO, S.C.; SOUZA, M.A.; LAZZARINI, I.; PAULINO, P.V.R.; QUEIROZ, A.C. Intake and

digestibility in cattle fed low-quality tropical forage and supplemented with nitrogenous compounds. Revista Brasileira de Zootecnia, v.38, n.10, p.2021-2030, 2009.

SHINKAI, T., UEKI, T.; KOBAYASHI, Y. Detection and identification of rumen bacteria constituting a fibrolytic consortium dominated by Fibrobacter succinogenes. Animal Science Journal, v.81, p.72-79, 2010.

SINGH, K.M.; TRIPATHI, A.K.; PANDYA, P.R.; PARNERKAR, S.; RANK, D.N.;

KOTHARI, R.K.; JOSHI, C.G. Use of Real-Time PCR Technique in Determination of Major Fibrolytic and non Fibrolytic Bacteria Present in Indian Surti Bufaloes (Bubalus bubalis). Polish Journal of Microbiology, v.62, n.2, p. 195–200, 2013.

TAJIMA, K.; AMINOV, R.I.; NAGAMINE, T. Diet-Dependent Shifts in the Bacterial Population of the Rúmen Revealed with Real-Time PCR. Applied and Envonmental Microbiology, Washington, v.67, n.6, p.2766-2774, 2001.

WANAPAT, M.; CHERDTHONG, A. Use of Real-Time PCR Technique in Studying Rumen Cellulolytic Bacteria Population as Affected by Level of Roughage in Swamp Buffalo. Current Microbiology, v.58, p.294–299, 2009.

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Publicado

2019-12-31

Como Citar

SOUZA, L. L. de .; AZEVEDO, M. M. R.; HAGER, A. X. . DETECÇÃO MOLECULAR DE GRUPOS DE BACTÉRIAS FERMENTADORAS NO RÚMEN DE BOVINOS E BUBALINOS EM SANTARÉM-PA. Ciência Animal, [S. l.], v. 29, n. 4, p. 158–164, 2019. Disponível em: https://revistas.uece.br/index.php/cienciaanimal/article/view/9793. Acesso em: 26 dez. 2024.

Edição

Seção

Nota Técnica ou Científica