USO DO DMSO A 3% E DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE GLICEROL NA CURVA DE RESFRIAMENTO DO SÊMEN SUÍNO

Autores

  • Ludymila Furtado Cantanhêde Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias da Universidade Estadual do Ceará (UECE)
  • Daianny Barboza Guimarães Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias da Universidade Estadual do Ceará (UECE)
  • Tatyane Bandeira Barros Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias da Universidade Estadual do Ceará (UECE)
  • Aline Viana Dias Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias da Universidade Estadual do Ceará (UECE)
  • Lina Raquel Santos Araújo Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias da Universidade Estadual do Ceará (UECE),
  • Ricardo Toniolli Laboratório de Reprodução Suína e Tecnologia de Sêmen (UECE)

Palavras-chave:

Agentes crioprotetores, congelação, espermatozoide, varrão

Resumo

Este trabalho teve como objetivo testar o crioprotetor Dimetilsulfóxido (DMSO-3%) e o glicerol, em cinco concentrações (0,5%, 1%, 3%, 5% e 7%) em uma nova curva de resfriamento. Foram feitas sete coletas de sete varrões (n=49) através da técnica da mão enluvada. O DMSO (3%) e o glicerol foram adicionados separadamente ao diluente de congelação. Durante a análise da curva, a menor média de vigor espermático foi observada à concentração de 7% de glicerol. Na concentração de 1% de glicerol obteve-se maior média de motilidade espermática (72±12,3), sem diferença em relação à concentração de 5%. Maiores médias de vigor e motilidade espermática pós-descongelação foram observadas a 3% de glicerol, diferindo das concentrações de 0,5% de glicerol e 3% de DMSO quanto ao vigor e dos demais tratamentos quanto à motilidade espermática. No teste de resistência osmótica o glicerol a 3% como diluente de congelação proporcionou melhor proteção à membrana espermática, diferindo dos demais tratamentos, exceto do DMSO a 3% e glicerol a 1%. Observou-se maior porcentagem de células vivas na concentração de 5% e 7% de glicerol, diferindo das demais concentrações. Já o maior percentual de espermatozoides com acrossomas intactos foi observado quando se utilizou o diluente de congelação contendo glicerol a 3% (73,8±11,9). Os resultados do presente estudo, sugeriram que o glicerol, ainda é a melhor opção de crioprotetor a ser utilizada nos processos de criopreservação do espermatozoide suíno.

Referências

ALKMIN, D.V.; PARRILLA, I.; TARANTINI, T.; OLMO, D.; VAZQUEZ, J.M.; MARTINEZ, E.A.; ROCA, J. Seminal plasma affects sperm sex sorting in boars. Reproduction, Fertility and Development, v.28, p.556–564, 2016.

ALMLID, T.; JOHNSON, L.A. Effects of glycerol concentration, equilibration time and temperature of glycerol 172 addition on post-thaw viability of boar spermatozoa frozen in straws. Journal of Animal Science, v.66, p.2899-2905, 1988.

ANDRADE, A.F.C.; PEDROSA, A.C.; PASSARELLI, M.S.; MARTINS, S.M.M.K.

Protocolos e possibilidades de criopreservação de sêmen suíno. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.43, n.2, p.89-96, 2019.

ATHURUPANA, R.; FUNAHASHI, H. Milk supplements in a glycerol free trehalose freezing extender enhanced cryosurvival of boar spermatozoa. Asian Pacific Journal of Reproduction. v.5, n.1, p.58-62, 2016.

BALL, B.A.; VO, A. Osmotic tolerance of equine spermatozoa and the effects of soluble cryoprotectans on equine sperm motility, viability and mitochondrial membrane potential. Journal of Andrology, v.22, p.1061-1069, 2001.

BARIL, G.; CHEMINEAU, Y.; COGNIE, Y.; GUÉRIN, Y.; LEBOEUF, B.; ORGEUR, P.;

VALLET, J.C. Manuel de formation pour l’insémination artificielle chez les ovins et les caprins. 3a ed., Nouzilly: INRA, 216., 1993. 137p.

BARROS, T.B.; TONIOLLI, L.S.; GUIMARÃES, D.B.; FREITAS, E.N.; NUNES, T.G.P.; TONIOLLI, R. Curvas de resfriamento do sêmen do varrão diluído em ACP®103 adicionado de gema de ovo em concentração fixa. Ciência Animal Brasileira, v.17, n.4, p.540-549, 2016.

BERGERON, A.; MANJUNATH, P. New insights towards understanding the mechanisms of sperm protection by egg yolk and milk. Molecular Reproductive Development, v.3, p.1338-1344, 2006.

BIANCHI, I.; CALDERAM, K.; MADEIRA, E.M.; MASCHIO, E.F.; CORRÊA, E.K.; JUNIOR, T.L.; DESCHAMMPS, J.C.; CORRÊA, M.N. Crioprotetores intra e extra- celulares utilizados no congelamento do sêmen suíno. Suinocultura Industrial, v.09, p.32- 36, 2006.

BORTOLOZZO, F.P.; WENTZ, I.; BENNEMANN, P.E.; BERNARDI, M.L.;

WOLLMANN, E.B.; FERREIRA. F.M.; NETO, G.B. Suinocultura em ação: Inseminação artificial na suinocultura tecnificada. 1ª ed., Porto Alegre: Brasil, 2005. 185p.

CARDOSO, R.C.S.; SILVA, A.R.; UCHOA, D.C.; SILVA, L.D.M. Congelação do sêmen canino com um diluidor a base de água de coco acrescido de gema de ovo e glicerol. Ciência Animal, v.10, p.29-36, 2000.

CORRÊA, M.N.; MEINCKE, W.; LUCIA, J.R.T.; DESCHAMPS, J.C. Inseminação artificial em suínos. 1ª ed., Copyright. Pelotas, Brasil, 2001. 194p.

DAS, A.K.; AHMED, N.; LALRINTLUANGA, K.; AHMED, F.A.; ALI, M.A.; SUBUDHI, P.K.; DEURI, D.; KURMI, D.J. Effect of Different Glycerol Levels on Quality of Frozen Semen of Mizo Local Boar. Journal of Animal Research, v.6, n.5, p.859-862, 2016.

DEMEESTERE, I.; SIMON, P.; BUXANT, F.; ROBIN, V.; FERNADEZ, S.A.; CENTNER,

J.; DELBAERE, A.; ENGLERT, Y. Ovarian function and spontaneous pregnancy after combined heterotopic and orthotopic cryopreserved ovarian tissue transplantation in a patient previously treated with bone marrow transplantation: Case Report. Human Reproduction, v.21, p.2010-2014, 2006.

DERIVAUX, J. Reprodução dos Animais Domésticos. Zaragoza: Editora Acribia, 1980. 446p.

FISER, P.S. Interaction of cooling velocity, warming velocity and glycerol concentration on the survival of frozen-thawed boar sperm. Reproduction in Domestic Animals, Supplement. v.1, p.1123-137, 1991.

GARCIA-OLIVARES, A.; GARZON-PEREZ, C.; GUTIERREZ-PEREZ, O.; MEDRANO,

A. Effect of cooling to different sub-zero temperatures on boar sperm cryosurvival. Asian Pacific Journal of Reproduction. v.5, n.1, p.63-66, 2016.

GAYLOR CHEMICAL COMPANY (GCC). Dimethyl sulfoxide (DMSO) health and safety information. Slidell Bulletin, n.106, 2007. 16p.

GRAHAM, J. K.; MOCÉ, E. Fertility evaluation of frozen/thawed semen. Theriogenology. v.64, p.492-504, 2005.

HANCOCK, J.L.; HOVELL, G.J.R. The collection of boar semen. Veterinary Record, v.71, p.664-665, 1959.

KAROW, A.M. For mammalian embryologists. Georgia, USA. Cryobiology, v.70, p.1-37, 2001.

KAWANO, N.; SHIMADA, M.; TERRADA, T. Motility and penetration competence of frozen thawed miniature pig spermatozoa are substantially altered by exposure to seminal plasma before freezing. Theriogenology, v.61, p.351-364, 2004.

KIM, S.; LEE, Y.J.; JI, D.B.; KIM, Y.J. Evaluation of Different Cryoprotectants (CPAs) in Boar Semen Cryopreservation. Theriogenology, v.73, p.961-963, 2011.

KUMAR, S.; JHAMB, D.; MAURYA, S.N. Post vitrification survival of 2-cell stage IVP buffalo embryos: effect of concentration. Indian Journal of Animal Science, v.80, p.99-103, 2010.

LOPES, C.A.P.; ALVES, A.M.C.V.; JEWGENOW, K.; BÁO, S.N.; FIGUEIREDO, J.R.

Cryopreservation of canine ovarian cortex using DMSO or 1,3-propanediol. Theriogenology, v.86, n.5, p.1165-1174, 2016.

LOVELOCK, J.E.; BISHOP, M.W.H. Preservation of freezing damage to living cells by dimethyl sulfhoxide. Nature, v.183, p.1394-1395, 1959.

MADEIRA, E.M.; BIANCHI, I.; VIEIRA, M.B.; SCHNEIDER, A.; SEVERO, N.C.; PFEIFER, L.F.M.; CORRÊA, M.N. Avaliação de diferentes crioprotetores intra e extracelulares na criopreservação de sêmen de touros. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v.65, n.2, p.415-420, 2013.

MANJUNATH, P. New insights into the understanding of the mechanism of sperm protection by extender components. Animal Reproduction, v.09, p.809-815, 2012.

MAHMOUND, K.G.H.M.; SHOLKAMY, T.H.; AHMED, Y.F.; SEIDEL, G.E.; NAWITO,

M.F. Effect of different combination of cryoprotectantes on in vitro maturation of immature buffalo (Bubalus bubalis) oocytes vitrified by straw and open-pulled straw methods. Reproduction in Domestic Animals, v.45, p.565-571, 2010.

MARTIN RILLO, S.; MARTINEZ, E.; GARCIA ANTIGA, C.; De ALBA, C. Boar semen

evaluation in practise. Reproduction in Domestic Animals, v.31, p.519-526, 1996.

MEDEIROS, A.A.; ARAÚJO, A.A.; MOURA, A.A.A.; CAVALCANTE, J.M.M.; FIGUEIRÊDO; RODRIGUES, L.F.S. Utilização do azul de bromofenol conservado a 4 oC e 29 oC, como método de coloração vital para a avaliação do espermatozoide ovino. Revista Ciência Agrária, v.46, p.287-297, 2006.

MORAES, C.N.; NEVES, J.P.; GONÇALVES, P.B.D.; OLIVEIRA, J.F.C.;

SCHWEITZER, C.M. Criopreservação do sêmen ovino em pellets com etileno glicol. Ciência Rural, v.28, n.2, p.287-292, 1998.

PAQUIGNON, M.; MERGOUNIS, D.; COUROT, M.; DU MESNIL DU BUISSON, F. Technologie de la congélation de la semence de verrat: étude in vitro. Journées de Recherche Porcine en France, v.6, p.71-76, 1974. PARKS, J.E.; GRAHAM, J.K. Effects of cryopreservation procedures on sperm membranes. Theriogenology, v.38, p.209-222, 1992.

PENA, J.F.; JOHANNSISSON, A.; WALLGREN, M.; RODRIGUEZ MARTINEZ, H. Assessment of fresh and frozen-thawed boar semen using an Annexin-V assay: a new method of evaluating sperm membrane integrity. Theriogenology, v.60, n.4, p.677-689, 2003.

PURDY, P.H. A review on goat sperm cryopreservation. Small Ruminant Research, v.63, p.215-225, 2006.

REVELL, S.G.; MRODE, R.A. An osmotic resistance test for bovine semen. Animal Reproduction Science, v.36, p.77-86, 1994.

SAS Statistical Analysis System. v.6.03 Cary: SAS Institute, 1988. 1028p.

SHAH, S.A.H.; ANDRABI, S.M.H.; AHMED, H.; QURESHI, I.Z. Cryoprotection synergism between glycerol and dimethyl sulfoxide improves the mitochondrial transmembrane potential, plasmalemma, acrosomal and DNA integrities, and in vivo fertility of water buffalo (Bubalus bubalis) spermatozoa. Cytotechnology, v.68, p.2335-2344, 2016.

SILVA, A.R.; GUERRA, M.M.P. Efeitos da criopreservação sobre as células espermáticas e alternativas para a redução das crioinjúrias. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.35, n.4, p.370-384, 2011.

SILVA, C.G.; CUNHA, E.R.; BLUME, G.R.; MALAQUIAS, J.V.; BÁO, S.N.; MARTINS,

C.F. Cryopreservation of boar sperm comparing different cryoprotectants associated in media based on powdered coconut water, lactose and trehalose. Cryobiology, v.70, n.2, p.90- 94, 2015.

SLAVIK, T. Effect of glycerol on the penetrating ability of fresh ram spermatozoa with zone-free hamster eggs. Journal of Reproduction and Fertility, v.79, p.99-103, 1987.

SMITAL, J. Effects influencing boar semen. Animal Reproduction Science, v.110, p.335– 346, 2009.

SOJKA, J.E.; BRISSON-KIMMICK, S.V.; CARLSON, G.P.; COPPOC, G.L. Dimithyl

sulfoxide update – New applications and dosing methods. Proceedings of the annual convention of the American Association of Equine Practitioners, v.36, p.683-690, 1990.

SOLOCINSKI, J.; OSGOOD, Q.; WANG, M.; CONNOLLY, A.; MENZE, M.A.; CHAKRABORTY, N. Effect of trehalose as an additive to dimethyl sulfoxide solutions on ice formation, cellular viability, and metabolism. Cryobiology, v.75, p.134–143, 2017.

SQUIRES, E.L.; PICKETT, B.W.; VANDERWALL, D.K.; Mc CUE, P.M.; BRUEMMER, J. Cooled and frozen stallion semen. Fort Collins: Colorado State University. Animal Reproduction and Biotechnology Laboratory, Bulletin, n.9, 1999. 80p.

STONE, R.W. Clinical uptates on the use of dimethyl sulfoxide. Canine Practice, v.18, p.16- 19, 1993.

TAN, X.; SONG, E.; LIU, X.; YOU, W.; WAN, F. Factors affecting the survival, fertilization, and embryonic development of mouse oocytes after vitrification using glass capillaries. In Vitro Cellular & Developmental Biolog, v.45, p.420-429, 2009.

TONIOLLI, R. Pouvoir fecondant des spermatozoïdes de verrat: amèlioration des conditions de conservation. 1996. 91p. (These de Doctorat.) - Université François Rabelais de Tours, France, 1996. Resumo disponível em http://cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=182303. Acesso em: 01/2012.

TONIOLLI, R.; CANTANHÊDE, L.F. Aspectos gerais da criopreservação de sêmen suíno. Ciência Animal, v.29, n.1, p.45-62, 2019.

TONIOLLI, R.; TONIOLLO, G.H.; FRANCESCHINI, P.H.; MORATO, F.M.A.C. Uso da água de côco em pó no processo de congelação do sêmen suíno: I. Controle durante o abaixamento da temperatura entre 30 e 15 oC. Ciência Animal, v.24, n.2, p.60-72, 2014. TONIOLLI, R.; TONIOLLO, G.H.; FRANCESCHINI, P.H.; MORATO, F.M.A.C. Uso do diluente BTS no processo de congelação do sêmen suíno: II. Modificações na técnica. Ciência Animal, v.25, n.4, p.44-59, 2015.

VARELA Jr, A.S.; CORCINI, C.D.; STREIT JUNIOR, D.P.; RIZZOTO, G.; JARDIM, R.D.; LUCIA JUNIOR, T.; FIGUEIREDO, M.R.C. Efeito crioprotetor de diferentes concentrações do dimetilsulfóxido no congelamento de sêmen de Tambaqui Colossoma macropomum. Atlântica, v.34, n.2, p. 119-135, 2012.

WATSON, P.F. Cooling of spermatozoa and fertilizing capacity. Reproduction in Domestic Animals, v.31, p.135-140, 1996.

WATSON, P.F. The causes of reduced fertility with cryopreserved semen. Animal Reproduction Science, v.60-61, p.481-492, 2007.

YANG, C.H.; WU, T.W.; CHENG, F.P.; WANG, J.H.; WU, J.T. Effects of different cryoprotectants and freezing methods on post-thaw boar semen quality. Reproductive Biology, v.16, n.1, p.41-46, 2016.

YESTE, M. Sperm cryopreservation update: Cryodamage, markers, and factors affecting the sperm freezability in pigs. Theriogenology, v.85, n.1, p.47–64, 2016.

YI, Y.J.; CHEON, Y.M.; PARK, C.S. Effect of N-acetyl-D-glucosamine, and glycerol concentration and equilibration time on acrosome morphology and motility of frozen-thawed boar sperm. Animal Reproduction Science, v.68, p.29-45, 2001.

Downloads

Publicado

2020-12-31

Como Citar

CANTANHÊDE, L. F.; GUIMARÃES, D. B. .; BARROS, T. B. .; DIAS, A. V.; ARAÚJO, L. R. S. .; TONIOLLI, R. USO DO DMSO A 3% E DIFERENTES CONCENTRAÇÕES DE GLICEROL NA CURVA DE RESFRIAMENTO DO SÊMEN SUÍNO. Ciência Animal, [S. l.], v. 30, n. 1, p. 47–63, 2020. Disponível em: https://revistas.uece.br/index.php/cienciaanimal/article/view/9651. Acesso em: 21 maio. 2024.

Edição

Seção

Artigos Originais