AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE DA PROTEÍNA QUINASE P34CDC2 NA MATURAÇÃO IN VITRO DE OÓCITOS CANINOS

Autor/innen

  • Leda Maria Costa Pereira Dpto de Reprodução Animal e Radiologia Veterinária
  • Paulo Ricardo de Oliveira Bersano Laboratório de Patologia e Medicina Legal Veterinária
  • Maria Denise Lopes Dpto de Reprodução Animal e Radiologia Veterinária

Schlagworte:

Proteína quinase, oócitos, p34cdc2, maturação, cadela

Abstract

O controle do ciclo celular é regulado por uma cascata de eventos coordenados que podem atuar influenciando na expressão ou repressão da atividade de proteínas relacionadas a retomada da meiose. Estudos indicam que a atividade dessas proteínas mostra-se tempo-dependente no processo de maturação in vitro (MIV). Esse trabalho teve o objetivo de avaliar a cinética da atividade quinase p34cdc2 durante a MIV de oócitos caninos. Os ovários foram obtidos de 40 cadelas submetidas à ovário-salpingo-histerectomia (OSH) eletiva. Após a OSH, os ovários foram imediatamente transportados a uma temperatura de 4 ºC. No laboratório, os ovários foram seccionados em fatias finas ("slicing"), para a liberação dos complexos cumulus-oócito (COCs). Apenas os COCs grau 1 foram selecionados e colocados em meio de maturação por um período de 24, 48 e 72 h de maturação. Após o cultivo, os COCs foram colocados em placas contendo solução de hialuronidase 0.2% para a retirada completa das células do cumulus. A atividade da proteína p34cdc2 foi detectada por ELISA. Com base nos resultados verifica-se que a atividade da proteína mostra-se tempo-dependente, atingindo o pico após 48h de MIV (p<0,01). Após 72h, a atividade demonstrou um decréscimo. Com base neste estudo pode-se concluir que a proteína quinase p34cdc2 desempenha uma função de suma importância na progressão da meiose em cadelas. Dessa forma, a compreensão melhor dessa proteína assim como de outras que participam do processo de maturação poderá contribuir para o estabelecimento de meios mais adequados que melhorem significativamente as taxas de maturação.

Literaturhinweise

ALLARD, P.; YANG, Q.; MARZLUFF, W.F.; CLARKE, H.J.; 2005: The stem-loop binding protein regulates translation of histone mRNA during mammalian oogenesis. Developmental Biology, v.286, n.1, 2005.

CALDER, M.D.; CAVENEY, A.N.; SIRARD, M.A.; WATSON, A.J. Effect of serum and cumulus cell expansion on marker gene transcripts in bovine cumulus-oocytes complexes during maturation in vitro. Fertility and Sterility, v.83, p.1077-1085, 2005.

CURCIO, B.R.; LEON, P.M.M.; JUNIOR, F.F.; NOGUEIRA, C.E.W.; DESCHAMPS, J.C. Equinos: oogênese, foliculogênese e maturação. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.20, p.28-35, 2006.

DE VANTERY, C.; GAVIN, A.C.; VASSAKKI, J.D.; SCHORDERET-SLATKINE, S. An accumulation of 34 cdc2 at the end of mouse oocyte growth correlates with the acquisition of meiotic competence. Developmental Biology, v.174, p.335-344, 1996.

GAUTIER, J.; NORBURRY, C.; LOHKA, M.; NURSE, P.; MALLER, J. Purified maturation promoting factor contains the product of a Xenopus homolog of the fission yeast cell cicle control gene p34cdc2. Cell, v.54, p.433-439, 1998.

HAMPL, A.; EPPIG, J.J. Analysis of the mechanism of metaphase I arrest in maturating mouse oocytes. Development, v.121, p.925- 933, 1995.

HEWITT, D.A.; ENGLAND, G.C.W. 1997: The effect of pre-ovulatory endocrine events upon maturation of oocytes of the domestic bitch. Journal of Reproduction and Fertility, v.51, p.83-91, 1997.

JOSEFSBERG, L.B.; GALIANI, D.; LAZAR, S.; KAUFAMAN, O.; SEGER, R.; DEKEL N. MPF governs MAPK activation and interphase suppression during meiosis of rat oocytes. Biology of Reproduction, v.68, p.1282-1290, 2003.

KANATSU-SHINOHARA, M.; SCHULTZ, R.M.; KOPF, G.S. Acquisition of meiotic competence in mouse oocytes: Absolute amounts of p34(cdc2), cyclin b1, cdc25C, and weel in meiotically incompetent and competent oocytes. Biology of Reproduction, v.63, p.1610-1616, 2000.

KOVO, M.; KANDLI-COHEN, M.; BEN-HAIM, M. An activeprotein kinase A (PKA) is involved in meiotic arrest of rat growing oocytes. Society for Reproduction and Fertility, v.132, p.33-43, 2006.

LEDAN, E.; POLANSKI, Z.; TERRET, M-E.; MARO, B. Meiotic maturation of the mouse oocyte requires an equilibrium between cyclin B synthesis and degradation. Developmental Biology, v.232, p.400-413, 2001.

MERMILLOD, P.; TOMANEK, M.; MARCHAL, R.; MEIJER, L. High developmental competence of cattle oocytes maintained at the germinal vesicle stage for 24 hours in culture by specific inhibition of MPF kinase activity. Molecular Reproduction and Development, v.55, p.89-95, 2000.

MOTLIK, J.; PAVLOK, A.; KUBELKA, M.; KALOUS, J.; KALAB, P. Interplay between cdc2 kinase and MAP kinase pathway during maturation of mammalian oocytes. Theriogenolgy, v.49, 461-469, 1998.

MOUROT, M.; DUFORT, I.; GRAVEL, C.; ALGRIANY, O.; DIELEMAN, S.; SIRARD, M, A. The influence of follicle size, FSH-enriched maturation medium and early cleavage on bovine oocyte maternal mRNA levels. Molecular Reproduction and Development, v.73, n.11, p.1367-1379, 2006.

RACEDO, S.E.; WRENZYCKI, C.; HERRMANN, D.; SALAMONE, D.; NIEMANN, H. Effects of follicle size and stage of maturation on mRNA expression in bovine in vitro matured oocytes. Molecular Reproduction and Development, v.75, p.17-25, 2008.

REYNAUD, K.; FONTBONNE, A.; MARSELOO, N.; THOUMIRE, S.; CHEBROUT, M.; VIARIS DE LESEGNO, C.; CHASTANT-MAILLARD, S. In vivo meiotic resumption, fertilization and early embrionary development in the bitch. Reproduction, v.130, p.193-201, 2005.

SUZUKAMO, C.; HOSHINA, M.; MORIYA, H.; HISHIYAMA, N.; NAKAMURA, S.; KAWAI, F.; SATO, H.; ARIGA, M.; ITO, J.; KASHIWAZAKI, N. Kinetics of nuclear status and kinase activities during in vitro maturation of canine oocytes. Journal of Reproduction and Development, v.55, n.2, p.116-120, 2009.

TAY, J.; HODGMAN, R.; RICHTER, D. The control of cyclin B1 mRNA translation during mouse oocyte maturation. Developmental Biology, v.221, p.1-9, 2000.

TSUTSUI, T. Gamete physiology and timing of ovulation and fertilization in dogs. Journal of Reproduction and Fertility, v.39, p.269-275, 1989.

Veröffentlicht

2023-10-02

Zitationsvorschlag

PEREIRA, L. M. C.; BERSANO, P. R. de O.; LOPES, M. D. AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE DA PROTEÍNA QUINASE P34CDC2 NA MATURAÇÃO IN VITRO DE OÓCITOS CANINOS. Ciência Animal, [S. l.], v. 27, n. 1, p. 41–54, 2023. Disponível em: https://revistas.uece.br/index.php/cienciaanimal/article/view/11510. Acesso em: 20 juli. 2024.

Ausgabe

Rubrik

Artigos Originais