PERFIL PROTEICO DE OÓCITOS CANINOS
Palavras-chave:
Maturação in vitro, ciclo celular, proteômica, cadelasResumo
O presente estudo foi conduzido para caracterizar o proteoma de oócitos caninos. Oócitos foram coletados de 120 cadelas e apenas os COCs grau 1 foram selecionados para o cultivo in vitro. Após o cultivo, os oócitos foram submetidos à extração de proteínas. As proteínas foram digeridas com tripsina e analisadas por espectrometria de massa. Trinta e quatro proteínas foram identificadas nos oócitos caninos. Estas proteínas foram agrupadas em três categorias de acordo com a sua função biológica, molecular e localização celular. Quanto ao processo biológico, foram encontradas diversas proteínas envolvidas no ciclo celular, fertilização, regulação da transcrição e via de sinalização. A análise da ontologia do gene revelou alta porcentagem de proteínas envolvidas na atividade de ligação. Com base na análise da rede proteína-proteína usando a plataforma STRING, observou-se que a vimentina apresentou interações com as CASP3, CASP6, CASP7 e CASP8, envolvidos na apoptose. O componente de complemento C3, interagiu com receptores do complemento, como CR1 e CR2. A proteína de ligação retinol 4 interagiu com precursores de retinol. Actina esteve intimamente relacionada com as proteínas cofilinas 1 e 2. A queratina 10 interagiu com a proteína CDK9 relacionada ao processo de sinalização celular. Essas proteínas são essenciais para o desenvolvimento completo de oócitos e fertilização. O presente estudo contém a primeira descrição da composição proteica dos oócitos caninos. A construção de bibliotecas de proteínas de oócitos, para cada espécie, estabelecerá as bases para a compreensão e o mapeamento dos eventos cruciais que definem a competência dos oócitos.
Referências
ANDERSON, D.J.; ABBOTT, A.F.; JACK, R.M. The role of complement component C3b and its receptors in sperm-oocyte interaction. Proceedings of the National Academy of Science, v.90, p.11051-10055, 1993.
BRADFORD, M.A. Rapid and sensitive method for the quantification of microgram quantities of protein utilizing the principles of protein-dye binding. Analytical Biochemistry, v.72, p.248-254, 1976.
CURCIO, B.R.; LEON, P.M.M.; JUNIOR, F. F.; NOGUEIRA, C.E.W.; DESCHAMPS, J.C.; Equinos: oogênese, foliculogênese e maturação. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.30, p.28-35, 2006
GUPTA, M.K.; JANG, J.M.; JUNG, J.W.; UHM, S.J.; KIM, K.P.; LEE, H.T. Proteomic analysis of parthenogenetic and in vitro fertilized porcine embryos. Proteomics, v.9, p.2846–60, 2009.
KONG, Q.; XIE, B.; LI, J.; HUAN, Y.; HUANG, T.; WEI, R.; LV, J.; LIU, S.; LIU, Z. 2014. Identification and characterization of an oocyte factor required for porcine nuclear reprogramming. The Journal of Biological Chemistry, v.89, p.6960-8, 2014.
KÖRNER, C.G.; WORMINGTON, M.; MUCKENTHALER, M.; SCHNEIDER, S, DEHLIN E, WAHLE E. The deadenylating nuclease (DAN) is involved in poly (A) tail removal during the meiotic maturation of Xenopus oocytes. The EMBO Journal, v.17, p.5427–5437, 1998.
LEHTONEN, E.; LEHTO, V.P.; VARTIO, T.; BADLEY, R.A.; VIRTANEN, I. Expression of cytokeratin polypeptides in mouse oocytes and preimplantation embryos. Development Biology, v.100, p.158-165, 1983.
LIVINGSTON, T.; EBERHARDT, D.; EDWARDS, J.L.; GODKIN, J. Retinol improves bovine embryonic development in vitro. Reproductive Biology and Endocrinology, v.2, p.83, 2004.
MEMILI, E.; PEDDINTI, D.; SHACK, L.A.; NANDURI, B.; MCCARTHY, F.; SAGIRKAYA, H.; BURGESS SC. Bovine germinal vesicle oocyte and cumulus cell proteomics. Reproduction, v.133, p.1107–20, 2007.
MORISHIMA, N. Changes in nuclear morphology during apoptosis correlate with vimentin cleavage by different caspases located either upstream or downstream of Bcl-2 action. Gene cells, v.4, p.401-414, 1999.
NOLASCO, S.; BELLIDO, J.; GONÇALVES, J.; ZABALA, J.C.; SOARES, H. Tubulin cofactor A gene silencing in mammalian cells induces changes in microtubule cytoskeleton, cell cycle arrest and cell death. FEBS Letter, v.579, p.3515-3524, 2005.
OTOI, T.; SHIN, T.; KRAEMER, D.C.; WESTHUSIN, M. Role of cumulus cells on in vitro maturation of canine oocytes. Reproduction in Domestical Animals, v.42, p.184–189, 2007.
PARAMIO, J.M.; SEGRELLES, C.; RUIZ, S.; JORCANO, J. L. Inhibition of protein kinase b (pkb) and pkczeta mediates keratin k10-induced cell cycle arrest. Molecular and Cellular Biology, v.1, p.7449-7459, 2001.
PEREIRA, L.M.C.; BERSANO, P.R.O.; LOPES, D. Efeito do fator de crescimento epidermal (EGF) na maturação in vitro de oócitos caninos. Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science, v.51, p.158-165, 2014.
REGO, J.P.A.; CRISP, J.M.; MOURA, A.A.; NOUWENS, A.S.; LI, Y.; VENUS, B.; CORBET, N.J.; CORBET, D.H.; BURNS, B.M.; BOE-HANSEN, G.B.; MCGOWAN, M.R. Seminal plasma proteome of electroejaculated Bos indicusbulls. Animal Reproduction Science, v.148, p.1–17, 2014.
SCHWEIGERT, F.J.; SIEGLING, C. Immunolocalization of retinol-binding protein, cellular retinoic acid-binding protein I and retinoid X receptor beta in the porcine reproductive tract during the oestrous cycle. Reproduction, Fertility and Development, v.13, p.421-6, 2001.
SNEL, B.; LEHMANN, G.; BORK, P.; HUYNEN, M.A. STRING: a web-server to retrieve and display the repeatedly occurring neighbourhood of a gene. Nucleic Acids Resaearch, v.28, p. 3442-3444, 2000.
THRATHUM, B.; SROYRAYA, M. Protein Profile Involved in Mammalian Oocyte Maturation, Fertilization and Early Embryogenesis (PreImplantation). Cell and Developmental Biology, v.6, p.189, 2017.
VAN DEN HURK, R.; SANTOS R. Development of fresh and cryopreserved early-stage ovarian follicles, with special attention to ruminants. Animal Reproduction, v.6, p.72-95, 2009.
VITALE, A.M.; CALVERT, M.E.; MALLAVARAPU, M.; YURTTAS, P.; PERLIN, J.; HERR, J.; COONROD, S. Proteomic profiling of murine oocyte maturation. Molecular Reproduction and Development, v.74, p.608–616, 2007.
VORONINA, E.; MARZLUFF, W.F.; WESSEL, G.M. Ciclin B syntesis is requered for sea urchin oocyte maturation. Developmental Biology, v.256, p.258-75, 2003.
WU, G.M.; LAI, L.; MAO, J.; MCCAULEY, T.C.; CAAMAÑO, J.N.; CANTLEY, T.; RIEKE, A.; MURPHY, C.N.; PRATHER, R.S.; DIDION, B.A.; DAY, B.N. Birth of piglets by in vitro fertilization of zona-free porcine oocytes. Theriogenology, v.62, p.1544-1556, 2004.
YU, X.J.; YI, Z.; GAO, Z.; QIN, D.; ZHAI, Y.; CHEN, X.; OU-YANG, Y.; WANG, Z.B.; ZHENG, P.; ZHU, M.S.; WANG, H.; SUN, Q.Y.; DEAN, J.; LI, L. 2014. The subcortical maternal complex controls symmetric division of mouse zygotes by regulating F-actin dynamics. Nature Communications, v.5, p.4887, 2014.
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